Daun jeruk lemon merupakan salah satu bagian tanaman yang memiliki khasiat yang sama seperti perasan buah dan kulit jeruk lemon yaitu sebagai antibakterial terhadap suatu bakteri. Daun jeruk lemon memiliki khasiat sebagai tanaman yang memiliki aktivitas antibakterial karena memiliki senyawa yang dapat membunuh bakteri. Penelitian ini ditujukan untuk mengetahui jenis senyawa kimia yang terkandung di dalam ekstrak Etanol 96% daun jeruk lemon dan mengetahui aktivitas antibakteri ekstrak Etanol 96% daun jeruk lemon terhadap bakteri S. epidermidis. Ekstraksi dari daun jeruk lemon dilakukan dengan menggunakan metode maserasi dengan pelarut etanol 96% dan diujikan terhadap bakteri S. epidermidis dengan metode difusi cakram. Ekstrak Etanol 96% daun jeruk lemon memiliki daya hambat terhadap bakteri S. epidermidis. Ekstrak Etanol 96% daun jeruk lemon dengan konsentrasi 200.000 ppm, 300.000 ppm, 400.000 ppm dan 500.000 ppm berturut memiliki daya hambat sebesar 7,366 mm, 9,5 mm, 7,79 mm dan 17,783 mm. Dari hasil yang telah diperoleh, ekstrak Etanol 96% daun jeruk lemon memiliki aktivitas aktibakteri.